簡要描述:聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA為模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下,將該段DNA擴增至足夠數(shù)量,以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析賽默飛 75003489 PCR 8×8 轉(zhuǎn)頭 帶螺旋蓋
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賽默飛 75003489 PCR 8×8 轉(zhuǎn)頭 帶螺旋蓋
聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA為模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下,將該段DNA擴增至足夠數(shù)量,以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析。PCR檢測方法在臨床上快速診斷細(xì)菌性傳染病等方面具有極為重要的意義。
PCR原理用于擴增位于兩段已知序列之間的DNA片段,類似于天然DNA的復(fù)制過程。以擬擴增的DNA分子為模板,以一對分別與模板5’末端和3’末端互補的寡核苷酸片段為引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留復(fù)制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成,重復(fù)這一過程,即可使目的DNA片段得到擴增。
1、PCR是現(xiàn)在實驗室常用的技術(shù)手段之一。
2、一般用于病原的檢測,分子機制中各基因的檢測以及遺傳相關(guān)的檢測。
3、感染性疾病PCR在醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)中最有價值的應(yīng)用領(lǐng)域就是對感染性疾病的診斷。
4、理論上,只要樣本有一個病原體存在,PCR就可以檢測到。
5、一般實驗室也能檢出10~100基因拷貝,而目前病原體抗原檢測方法一般需要105-7個病原體才可檢測到。
6、PCR對病原體的檢測解決了免疫學(xué)檢測的“窗口期"問題,可判斷疾病是否處于隱性或亞臨床狀態(tài)。
7、定量PCR研究資料已表明,病原體數(shù)量與感染性疾病病情的輕重程度、傳染性及治療效果均有相關(guān)性。
8、許多研究表明,人類免疫缺陷病毒(HIV)感染后,潛伏期長短和臨床癥狀輕重與血液中的病毒量顯著相關(guān);也有研究表明,HIV病毒載量低于一定值時,沒有傳染性。
9、在乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒定量研究中發(fā)現(xiàn),病毒的數(shù)量與某些藥物的療效相關(guān)。
10、例如,干擾素治療對肝炎病毒高拷貝者不敏感,低拷貝者敏感;而有些藥物則具有顯著降低病毒高拷貝的作用。
11、腫瘤癌基因的表達(dá)增加和突變,在許多腫瘤早期和良性的階段就可出現(xiàn)。
12、PCR技術(shù)不但能有效的檢測基因的突變,而且能準(zhǔn)確檢測癌基因的表達(dá)量,可據(jù)此進(jìn)行腫瘤早期診斷、分型、分期和預(yù)后判斷。
13、幾乎所有慢性骨髓性白血病患者都可檢測到原癌基因易位導(dǎo)致的BCR/ABL融合基因形成,定量PCR技術(shù)可通過檢測BCR/ABL融合基因的表達(dá)確定微量殘余惡性細(xì)胞存在的數(shù)量,以此作為治療效果和估計復(fù)發(fā)的危險性的依據(jù)。
14、一些病毒致癌作用也與病毒載量有關(guān),EB病毒載量的FQ-PCR檢測結(jié)果已被用于鼻咽癌早期發(fā)現(xiàn)和隨訪。
15、遺傳病PCR技術(shù)首ci臨床應(yīng)用就是從檢測鐮狀細(xì)胞和β-地中海貧血的基因突變開始的。
16、基因的突變和缺失均會引起各種珠蛋白的表達(dá)不平衡,用FQ-PCR檢測各種珠蛋白基因表達(dá)差異,是地中海貧血診斷的有效手段。
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